STAGE AU CENTRE INTERNATIONAL DE RECHERCHE SUR LE CANCER

Ce stage, effectué de septembre à novembre 1999, a été réalisé au sein de l'équipe de recherche des Prédispositions Génétiques au Cancer (Genetic Cancer Susceptibility) du Docteur Giovanni ROMEO du Centre International de Recherche sur le Cancer (Lyon, France).

Thèmes de travail

Recherche de SNP (Single Nucleotide Polymorphisms) dans le gène IGFBP3 (Insulin-like Growth Factor Receptor 3) par une technique de chromatographie liquide haute performance en conditions partiellement dénaturantes (DHPLC).

Etablissement d'un catalogue des enzymes de restriction disponibles au laboratoire et vérification de leur activité.

Techniques utilisées

• Extraction d'ADN génomique à partir d'échantillons sanguins
• PCR : de la conception des amorces à l'amplification des fragments à partir d'ADN génomique
• Migration électrophorétique en gel d'agarose
• Recherche des gradients et températures optimaux, puis mise en évidence des polymorphismes du gène IGFBP3 par DHPLC (Denaturing High Performance Liquid Chromatography)
• Caractérisation des polymorphismes par séquençage (séquenceur ABI 377)
• Contrôle de l'activité d'enzymes de restriction par digestion de l'ADN du phage lambda